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三聚氰胺ELISA試劑盒實驗原理及注意事項

點擊次數(shù):13110   發(fā)布時間:2016/1/8 10:53:04

 使用目的:本試劑盒用于飼料中三聚氰胺殘留的定量檢測。
三聚氰胺elisa試劑盒實驗原理:
本試劑盒采用競爭 ELISA 方法,在微孔板包被有三聚氰胺偶聯(lián)抗原,加入三聚氰胺標準品或樣品,游離三聚氰胺與微孔條上預包被的三聚氰胺偶聯(lián)抗原互相競爭抗三聚氰胺抗體酶標記物,用 TMB 底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色,用酶標儀在 450nm 波長下進行檢測,吸光值與樣品中三聚氰胺含量成反比,通過標準曲線計算樣品中三聚氰胺的含量。
樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴格按說明書操作,提取過程中應準確稀釋,否則會出現(xiàn)結(jié)果不準確,樣品應當保存在陰涼避光之處及冷藏保存)
1.取10g粉碎的樣品,加 20ml 70%甲醇溶液
2.強力振蕩3分鐘
3.用Whatman No 1濾紙過濾
4.取25µl處理后的樣品,加入25µl樣本稀釋液于反應孔中(樣本稀釋倍數(shù)為2)
三聚氰胺ELISA試劑盒參數(shù):
本試劑盒檢測下限為0.05ppb
B0吸光度*佳值應大于1.0
試劑盒吸光度板內(nèi)誤差小于8%, 板間誤差小于15%。
用本說明書提供的組織樣本提取方法回收率大于80%。
三聚氰胺ELISA試劑盒注意事項:
1.使用試劑盒前請仔細閱讀說明書。
2.不要使用過期試劑盒。
3.試劑盒使用前,將試劑恢復至室溫( 25±2℃), 建議至少回溫2小時。
4.標準品中含有三聚氰胺,使用時應特別注意,操作時應帶手套。
5.終止液中含有硫酸,使用時防止灼傷皮膚及腐蝕衣物。
6.不同標準品、樣品所用吸頭不能混用,否則會影響試驗結(jié)果。
7.不同批號試劑盒中的試劑不得混用;不同標準品、樣品所用吸頭不得混用,否則會影響實驗結(jié)果。

原創(chuàng)作者:上海恒遠生物科技有限公司

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