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細(xì)胞培養(yǎng)中如何消除組織培養(yǎng)的污染呢?

點擊次數(shù):12940   發(fā)布時間:2018/11/2 10:41:58

    當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細(xì)胞系有毒性,因而,做劑量反應(yīng)實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是我司推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟:

1. 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。
2. 分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如,兩性霉素B推薦下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。

3. 每天觀測細(xì)胞毒性指標(biāo),如脫落,出現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。

4. 確定抗生素毒性水平后,使用低于毒性濃度2~3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2~3代。

5. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代。

6. 重復(fù)步驟4。

7. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4~6代,確定污染是否以已被消除。


     上海恒遠(yuǎn)分析細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)也叫細(xì)胞克隆技術(shù),在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù),還是其中的生物克隆技術(shù)來說,細(xì)胞培養(yǎng)都是一個必不可少的過程,歡迎來電咨詢。

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司

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