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你知道洗滌方法嗎?

閱讀次數(shù):1089   發(fā)布時間:2019/7/29 10:38:24

 洗滌這是實驗操作過程中看似很簡單但又至關重要的一個步驟,所以上海恒遠生物科技有限公司結合了技術人員的建議和指導來給你們普及一下這方面的知識。
 
    洗滌方法:
 
    1.自動洗板機:每孔加入洗滌液350ml,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。
 
    2.手工洗板:甩盡孔內液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350ml,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。
生物試劑實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。
 
    3.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?瞻卓准訕悠废♂屢100ml,余孔分別加標準品或待測樣品100ml,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
 
    4.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液100ml(在使用前15分鐘內配制),酶標板加上覆膜,37℃溫育1小時。
5.棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350ml/每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內液體拍干。
 
    6.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內配制)100ml,加上覆膜,37℃溫育1小時。
    7.棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
 
    8.每孔加底物溶液100ml,酶標板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當標準孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。
 
    9.每孔加終止液50ml,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。
 
    10.立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀電源,預熱儀器,設置好檢測程序。
 
    11.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。
 
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