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CH50,人血清總補體ELISA試劑盒供應(yīng)商

CH50,人血清總補體ELISA試劑盒供應(yīng)商
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價格: 4900

型號:

采購度:154    原產(chǎn)地:美洲

發(fā)布時間:2018/2/5 16:32:12

產(chǎn)品簡介:CH50,人血清總補體ELISA試劑盒供應(yīng)商用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人血清總補體(CH50)的含量。

在線詢價咨詢電話:18221656311

詳細信息
CH50,人血清總補體elisa試劑盒供應(yīng)商
 
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關(guān)液體樣本中人血清總補體(CH50)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷

實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人血清總補體(CH50)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人血清總補體(CH50)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

CH50,人血清總補體ELISA試劑盒供應(yīng)商中內(nèi)容】(96T)
材料 數(shù)量
標(biāo)準(zhǔn)品 96T(2vial)
預(yù)包被抗體的96孔板 96T(8×12)
生物素標(biāo)記人ANG抗體 96T (1:100)
ABC(親和素-過氧化物酶復(fù)合物) 96T (1:100)
樣品稀釋液 96T×2
抗體稀釋液 96T×1
ABC稀釋液 96T×1
TMB顯色液A 96T×1
TMB顯色液B 96T×1
TMB終止液 96T×1
ELISA專用洗滌液 96T×1(1:25)

【需要而未提供的試劑和器材】
1. 37℃恒溫箱。
2. 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
3. 自動洗板機。
4. 單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
5. 蒸餾水,容量瓶等
6. 干凈的試管和Eppendof管。

【注意事項】
1. 從-20℃取出的試劑盒,在4℃解凍guoye。盒內(nèi)每一瓶解凍的溶液在開啟瓶蓋之前都要輕輕搖勻,避免解凍時出現(xiàn)的分層,否則會出現(xiàn)濃度不均一的現(xiàn)象。
2. 開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。
3. 配制各種試劑時,切記混勻!
4. 用戶在初次使用試劑盒時,應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘,以便試劑集中到管底。
5. 建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本都做雙份檢測。
6. 要嚴格避免操作過程中酶標(biāo)板干燥。干燥會使酶標(biāo)板上生物成份迅速失活!
7. 為免交叉污染,要避免重復(fù)使用手中的吸頭和試管。

【洗板方法】

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的PBS或TBS洗滌緩沖液至少0.35ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

【樣品的準(zhǔn)備和保存】
樣品如果不立即分析,應(yīng)分裝后冷凍保存,且避免反復(fù)凍融。
血清——用干凈試管收集血液,室溫凝固2小時或4℃guoye,離心1000×g 10分鐘,收集血清。立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。
細胞培養(yǎng)、組織勻漿、體液——離心去除沉淀,立即分析或分裝后-20℃冷凍保存。

【樣品稀釋的一般原則】
用戶須查閱文獻了解標(biāo)本內(nèi)待測因子的含量,決定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù),以使稀釋后樣品中待測因子的濃度處于ELISA試劑盒的*佳檢測范圍。樣品的稀釋應(yīng)有詳細記錄。

【試劑的準(zhǔn)備和保存】
A. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋和使用:在使用前2小時內(nèi)準(zhǔn)備。將凍干品管內(nèi)加入1ml樣品稀釋液,徹底溶解后做倍比稀釋。
8稀釋后的標(biāo)準(zhǔn)品在2小時內(nèi)使用。
B.生物素標(biāo)記抗體工作液:在使用前2小時內(nèi)準(zhǔn)備。
1. 根據(jù)每孔需要0.1ml計算總的用量(實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml)。
2.按10ul生物素標(biāo)記抗體稀釋液990ul的比例配制工作液。輕輕混勻。
C.親和素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)工作液的準(zhǔn)備:在使用前1小時內(nèi)準(zhǔn)備。
1.根據(jù)每孔需要0.1ml計算總的用量(實配時應(yīng)多配制0.1-0.2ml)。
2.按10ul親和素-過氧化物酶復(fù)合物(ABC)加ABC稀釋液990ul的比例配制工作液。輕輕混勻。
D. TMB顯色工作液的準(zhǔn)備:在使用之前30分鐘,按TMB顯色液A 9份加 TMB顯色液B 1份的比例配制TMB顯色工作液。

CH50,人血清總補體ELISA試劑盒供應(yīng)商操作程序】
1. 確定本次檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。
2. 將倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入。
3. 酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。
4. 反應(yīng)后用自動洗板機吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
5. 將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。
6. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌3次,每次浸泡1分鐘左右。
7. 將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。
8. 0.01M TBS或0.01M PBS洗滌5次,每次浸泡1-2分鐘左右。
9. 按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液,37℃避光反應(yīng),反應(yīng)過程中,要經(jīng)常的觀察,當(dāng)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔差別不明顯時,即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應(yīng)*長不要超過30分鐘)。
10. 用酶標(biāo)儀在450nm測定O.D.值。
11. 根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍,其實際濃度應(yīng)該×N。

更新時間:2024/9/19 9:16:19

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